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Keul-o-test Troponin I Schnelltest für den qualitativen Nachweis von kardialem Troponin I
in Vollblut, Serum oder Plasma.
Nur für die professionelle In-vitro-diagnostische Anwendung.
Bestellnummer: KGST124
DIMDI Reg.-Nr.: DE/CA22/1116-71-IVD
VERWENDUNGSZWECK Der Troponin I (cTnI) Test ist ein Hilfsmittel bei der Diagnose eines Myokardinfarkts (MI), das qualitativ Troponin I nachweist. Es handelt sich um einen immunchromatographischen Schnelltest, der mit Serum, Plasma oder Vollblut durchgeführt werden kann. Die analytische Sensitivität des Tests beträgt 1,0 ng/ml, bezogen auf Bio-Rad Herzmarker-Kontroll-Standard. Für den professionellen Gebrauch. VERWENDUNGSZEITRAUM
Bei einer Herzschädigung können nach Einsetzen des Schmerzes bis zu 6 Stunden vergehen, bis Troponin I im Blut freigesetzt wird und mit diesem Test nachzuweisen ist. Die Ausschüttung von cTnI ähnelt der des CK-MB; aber während CK-MB nach 72 Stunden auf das normale Niveau zurückkehrt, bleibt Troponin I über 6 - 10 Tage hinweg erhöht und stellt somit ein größeres Zeitfenster für den Nachweis einer Herzschädigung dar.
ÜBERSICHT
Das kardiale Troponin I (cTnI) ist ein Protein, welches im Herzmuskel mit einem Molekulargewicht von 22,5 kDa gefunden wird.1 Troponin I ist ein Baustein eines Komplexes bestehend aus insgesamt drei Untereinheiten, außerdem bestehend aus Troponin T und Troponin C. Zusammen mit Tropomysin bildet dieses Gefüge den Hauptbestandteil, der die kalziumempfindliche ATPase Actomyosinaktivität in quer gestreiften Skelett- und Herzmuskeln reguliert.² Nach Auftreten einer Herzschädigung, wird 4 - 6 Stunden nach Einsetzen des Schmerzes Troponin I im Blut freigesetzt. Die Ausschüttung von cTnI ähnelt der des CK-MB; aber während CK-MB nach 72 Stunden auf das normale Niveau zurückkehrt, bleibt Troponin I über 5 - 7 Tage hinweg erhöht und stellt somit ein größeres Zeitfenster für den Nachweis einer Herzschädigung dar. Die hohe Spezifität der cTnI Messungen zum Nachweis einer myokardinalen Schädigung wurde bei operativen Eingriffen, nach Marathonläufen und stumpfen Thoraxtraumata (blunt chest trauma) demonstriert.³ Ausschüttungen von cTnI konnten auch bei anderen Leiden als dem akuten Myokardinfarkt (AMI) dokumentiert werden, so wie bei instabiler Angina, Stauungsinsuffizienz und Ischämieschäden aufgrund einer Bypassoperation der Koronararterien. Wegen seiner hohen Spezifität und Empfindlichkeit im myokardischen Gewebe ist Troponin I in letzter Zeit zum beliebtesten Biomarker für Myokardinfarkt geworden.
Der Troponin I (cTnI) Schnelltest ist ein einfacher Test, der eine Kombination von mit Anti-cTnI Antikörpern beschichteten Partikeln und weitere Bindungsreagenzien anwendet, um cTnI in Vollblut, Serum oder Plasma nachzuweisen. Die Mindestnachweisgrenze liegt bei 1,0 ng/ml. TESTPRINZIP
 Der Troponin I (cTnI) Schnelltest ist ein membrangebundener Immunoassay, der qualitativ cTnI im Vollblut, Serum oder Plasma nachweist. Die Membrane ist im Bereich der Testlinie mit einem Bindungsreagenz beschichtet.
Beim Testablauf reagiert die Vollblut-, Serum- oder Plasmaprobe mit markierten anti-cTnI Antikörpern. Dieses Gemisch chromatographiert durch den Teststreifen und kann mit dem Bindungsreagenz in der Testzone reagieren. Wenn die Probe cTnI enthält, erscheint eine rote Linie in der Testregion und damit liegt ein positives Ergebnis vor. Wenn die Probe kein cTnI enthält, wird in der Testregion keine Linie erscheinen. Dies weist auf ein negatives Ergebnis hin. Die rote Linie, die im Kontrollbereich erscheint, zeigt, dass eine ausreichende Probenmenge verwendet wurde und dass das die Probe die Membran vollständig durchlaufen hat.
REAGENZIEN
Der Schnelltest enthält markierte anti-cTnl Antikörpern und eine mit Bindungsreagenzien beschichtete Membrane.
WARNUNGEN UND VORSICHTSMASSNAHMEN
- Nur für die professionelle In-vitro-Diagnostik
- Feuchtigkeit und erhöhte Temperatur können die Ergebnisse negativ beeinflussen.
- Nicht nach Verfalldatum benutzen
- Der Test sollte bis zum Gebrauch in dem versiegelten Beutel bleiben
- Proben sind als potentiell infektiöses Material zu betrachten und daher als solches mit entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen zu behandeln. Tragen Sie Schutzkleidung wie Laborkittel, Einweghandschuhe oder Schutzbrille, wenn Proben getestet werden.
- Essen, trinken oder rauchen Sie nicht in dem Bereich, in dem mit den Proben oder Sets umgegangen wird.
- Benutzen Sie den Test nicht, wenn der Beutel beschädigt ist.
- Der gebrauchte Test sollte sachgemäß entsorgt werden.
Lagern Sie den Test wie verpackt im versiegelten Beutel bei Raumtemperatur (2 - 30°C). Die Testvorrichtung bleibt bis zum auf dem versiegelten Beutel aufgedruckten Haltbarkeitsdatum stabil. Die Testvorrichtung muss bis zum Gebrauch im versiegelten Beutel bleiben.
- Nicht einfrieren.
- Nicht nach dem Verfalldatum verwenden.
PROBENNAHME UND VORBEREITUNG
Der Troponin I (cTnI) Test kann mit Vollblut (venös oder aus Fingereinstich versetzt mit Heparin oder EDTA als Antikoagulanz), Serum oder Plasma durchgeführt werden. Trennen Sie Serum oder Plasma so schnell wie möglich vom Blut, um die Hämolyse zu vermeiden. Verwenden Sie nur klare und nicht hämolysierte Proben. Die Testdurchführung sollte unverzüglich nach der Probenentnahme durchgeführt werden. Bewahren Sie Proben nicht zu lange bei Raumtemperatur auf. Serum und Plasma können bei 2-8°C bis zu 3 Tagen aufbewahrt werden. Für eine längere Lagerung sollten die Proben bei unter -20°C aufbewahrt werden. Venöses Vollblut sollte bei 2-8°C aufbewahrt werden, wenn der Test innerhalb von 2 Tagen nach Probenentnahme durchgeführt wird. Vollblutproben nicht einfrieren. Bringen Sie die Proben vor Testdurchführung auf Raumtemperatur. Gefrorene Proben müssen vor Testdurchführung vollständig aufgetaut und gut gemischt werden. Proben sollten nicht wiederholt eingefroren und aufgetaut werden. Wenn Proben versendet werden sollen, sollten diese lokaler Verordnungen für ätiologische Mittel gemäß verpackt werden.
MATERIALIEN
MITGELIEFERTE MATERIALIEN
- Troponin I (cTnI) Testkassette
- Packungsbeilage
- Einwegpipette
ERFORDERLICHE ABER NICHT MITGELIEFERTE MATERIALIEN
- Zentrifuge (nur für Plasma/Serum)
- Probensammelbehälter
- Stoppuhr
- Lanzette (für Vollblut aus der Fingerkuppe)
- heparinisierte Kapillare (für Vollblut aus der Fingerkuppe)
GEBRAUCHSANLEITUNG
- Vor Testbeginn Troponin I (cTnI) Testkarte und Probe auf Raumtemperatur (15 – 30°C) bringen.
- Nehmen Sie den Troponin I (cTnI) Test aus dem versiegelten Beutel und benutzen Sie sie so bald wie möglich. Die besten Ergebnisse werden erzielt, wenn der Test unmittelbar nach Öffnung des Beutels durchgeführt wird. Stellen Sie ihn auf eine saubere und ebene Oberfläche.
Serum oder Plasma 
Träufeln Sie nacheinander (warten Sie stets etwa 10 Sek. bis der jeweilige Tropfen absorbiert wurde, bevor Sie den nächsten Tropfen zufügen. Es kann besonders bei Blut, durch zu schnelles Träufeln zu Verklumpungen führen) mit der beiliegenden Pipette 3 hängende Tropfen (120µl) Serum oder Plasma in das Probenfeld (S) des Troponin I (cTnI) Tests.
Venöses Vollblut
Träufeln Sie nacheinander (warten Sie stets etwa 10 Sek. bis der jeweilige Tropfen absorbiert wurde, bevor Sie den nächsten Tropfen zufügen. Es kann besonders bei Blut, durch zu schnelles Träufeln zu Verklumpungen führen) mit der beiliegenden Pipette 3 hängende Tropfen (120µl) EDTA oder heparinisiertes Vollblut in das Probenfeld (S) des Troponin I (cTnl) Tests. Die benötigte Tropfenanzahl kann je nach Volumen pro Tropfen variieren!
Vollblut aus Fingereinstich
Träufeln Sie nacheinander (warten Sie stets etwa 10 Sek. bis der jeweilige Tropfen absorbiert wurde bevor Sie den nächsten Tropfen zufügen. Es kann besonders bei Blut, durch zu schnelles Träufeln zu Verklumpungen führen) 3 (120µl) mit einer EDTA oder heparinisierten Kapillare gewonnene, hängende Tropfen Vollblut in das Probenfeld (S) des Troponin I (cTnl) Tests. Die benötigte Tropfenanzahl kann je nach Volumen pro Tropfen variieren!
 Beginnen Sie die Zeit zu stoppen. Fügen Sie einen weiteren Tropfen Probe hinzu, falls innerhalb von 30 Sekunden keine Rot-Färbung durch das Ergebnisfenster zu fließen beginnt. Warten Sie darauf, dass die rote(n) Linie(n) erscheint bzw. erscheinen. Lesen Sie das Ergebnis nach 15 Minuten ab. Lesen Sie nach mehr als 17 Minuten keine Ergebnisse mehr ab.
Achtung: Die angegebene Wartezeit basiert auf einer Raumtemperatur von 15-30°C. Wenn die Raumtemperatur deutlich unter 15°C liegt, ist die Wartezeit entsprechend zu erhöhen.
AUSWERTUNG DER ERGEBNISSE
Negativ
Nur eine rote Linie wird im Kontrollbereich (C) sichtbar.
Keine sichtbare rote oder rötliche Linie im Testbereich (T).
Positiv *
Zwei deutlich erkennbare Linien werden sichtbar.
Eine Linie im Kontrollbereich (C) und eine weitere im Testbereich (T).
Ungültig
Die Kontrollinie (C) ist nicht ausgebildet.
Unzureichendes Probenvolumen oder eine unsachgemäße Handhabung des Testes sind die häufigsten Fehlerursachen. Sollte bei einer Wiederholung mit ausreichender Probenmenge das gleiche Ergebnis vorliegen, setzen Sie sich bitte mit dem Hersteller des Troponin I (cTnI) Test in Verbindung.
* WICHTIGER HINWEIS: Der Farbton der Linie im Testbereich (T) kann je nach Konzentration des cTnI variieren, auch eine schwach blassrosa T-Linie ist als positives Ergebnis zu interpretieren.
QUALITÄTSKONTROLLE
Der Troponin I (cTnI) Test beinhaltet eine interne Funktionskontrolle (C-Linie), die anzeigt, ob eine ausreichende Probenmenge aufgetragen bzw. die Chromatographie beendet wurde. Kontrollstandards sind im Lieferumfang des Troponin I (cTnI) Tests nicht enthalten. Dennoch ist es zu empfehlen, dass Positiv- und Negativkontrollen als gute Laborpraxis durchgeführt werden.
EINSCHRÄNKUNGEN
- Der Troponin I (cTnI) Test sollte ausschließlich für den Nachweis von Troponin I in Vollblut-, Serum- oder Plasmaproben benutzt werden. (Nur zur In-vitro-Diagnostik). Der Troponin I (cTnI) Test ist ein rein qualitativer Nachweis von cTnI; es können weder Quantität noch Steigerungsraten von cTnl festgestellt werden.
- Der Troponin I (cTnI) Test zeigt nur die Anwesenheit von cTnI in der untersuchten Probe an und sollte nicht als einziges Kriterium für die Diagnose eines Myokardinfarkts benutzt werden.
- Der Troponin I (cTnI) Test kann Konzentration von cTnI, die unter 1,0 ng/ml liegen nicht nachweisen. Ein negatives Ergebnis schließt zu keiner Zeit die Möglichkeit eines stattgefundenen Myokardinfarkts aus.Nicht bei allen Patienten, die eine akute Herzschädigungen haben, soll Troponin I in Konzentrationen ≥ 1 ng/ml freigesetzt werden (siehe Literaturverzeichnis „Antman.. et al.")6.
- Wie alle diagnostischen Tests, müssen alle Ergebnisse zusammen mit anderen klinischen Informationen, die dem Arzt zur Verfügung stehen, ausgewertet werden.
- Proben, die außergewöhnlich hohe Konzentrationen heterophiler Antikörper oder rheumatischer Faktoren (RF) enthalten, können das Ergebnis beeinflussen. Selbst wenn die Testergebnisse positiv ausfallen, sollte eine weiterführende Beurteilung mit anderen Informationen, die dem Arzt zur Verfügung stehen, durchgeführt werden.
- Es besteht u. U. die Möglichkeit, dass bei Vollblutproben mit sehr hoher Viskosität oder bei Vollblutproben die für mehr als 2 Tage gelagert wurden, dass der Test keine Ergebnisse anzeigt. In diesem Fall sollte der Test mit einer neuen Karte und einer Plasma- oder Serumprobe desselben Patienten wiederholt werden.
- Grundsätzlich sind Schnelltests als finales Entscheidungskriterium über den Zustand eines Patienten nicht geeignet.
QUALITÄTSKONTROLLE DURCH DEN NUTZER
Eine Qualitätskontrolle mit Hilfe positiver und negativer Kontrollen sollte als Bestandteil guter Laborpraxis in regelmäßigen Zeitabstanden und vor der Nutzung einer neuen Charge des Tests erfolgen, um mit den erwarteten QC-Ergebnissen die Testdurchführung zu bestätigen. Die Positivkontrolle sollte so gewählt werden, daß sie ein schwach positives Ergebnis im T und C Bereich erbringt. Die Negativkontrolle sollte ein negatives Ergebnis erbringen (nur Kontrolllinie wird angezeigt). QC Proben sollten auch dann durchgeführt werden, wenn die Ergebnisse fraglich sind. Nach der Bestätigung der erwarteten Ergebnisse kann der Test für Patientenproben verwendet werden. Für Informationen zu den Kontrollen kontaktieren Sie bitte BGT BioGenTechnologies.
ERWARTETE WERTE
Der Troponin I (cTnI) Test wurde mit einem Dade's Stratus Cardiac Troponin-I Fluorometric Enzyme Immunoassay verglichen. Dieser kommerzielle Test nutzt einen Cutoff-Wert von 1,0 ng/mL. Der Troponin I (cTnI) Test wurde entwickelt um positive Ergebnisse für cTnl-Konzentrationen von mehr als 1,0 ng/ml nachzuweisen. Die erforderliche Zeit bis die Blut cTnI Konzentration ihre höchsten Normalwerte erreichen wurde nach 4-6 Stunden nach dem Einsetzen der Symptome gefunden, mit erreichten Maximalkonzentrationen nach 12 bis 24 Stunden. Der cTnI Wert bleibt in einigen Fällen für 5 bis 7 Tage erhöht. Daher schließt ein negatives Ergebnis innerhalb der ersten Stunden nach dem Einsetzen der Symptome ein AMI nicht sicher aus. Im Zweifelsfall sollte der Test in angemessenen Zeitabständen wiederholt werden. Untersuchungen der cTnI-Konzentrationen zeigten den diagnostischen Wert hinsichtlich bestimmter klinischer Symptome, die postoperativ, nach traumatischen Verletzungen, bei Patienten mit Nierenerkrankung, bei Patienten mit Anfällen und bei solchen mit Sekettmuskelmyopathien auftreten.
LEISTUNGSMERKMALE
Querempfindlichkeiten
Der Troponin I (cTnI) Test wurde getestet und es wurde bei Proben, die 16 g/dl menschliches Albumin, 60 mg/dL Bilirubin (unkoaguliert), 4 g/dL freies Hämoglobin und 1.300 mg/dL Triglyzeride enthielten, keine Querempfindlichkeit festgestellt.
Die folgenden Medikamente wurden ebenfalls unter Verwendung des Troponin I (cTnI) Tests getestet und es wurde keine Querempfindlichkeit festgestellt.
| Acetaminophen | Cyclosporine | Koffein | Phenobarbital | | Acetylsalicylsäure | Diclofenac | L-Thyroxine | Phenytoin | | Allopurinol | Digoxin | Methaqualone | Probenecid | | Ambroxol | Dipyridamole | D,L-µ-Methyldopa | Procainamide | | Ampicillin | Dopamine | Nicotinicsäure | D,L-Propronolol | | Ascorbinsäure | Erythromycin | Nifedipine | Quinine | | Atenolol | Furosemide | Nitrofurantoin | Sulfmethoxazol | | Captopril | Glibenclamide | Noraminopyrine | Theophylline | | Chloramphanicol | Hydrochlorothiazide | Nystatine | Trimethoprim | | Chlordiazepoxide | Indomethacin | Oxazepam | Verapamil | | Cinnarizine | Isosorbide dinitrate | Oxytertacycline | |
Kreuzreaktivität
Seren, die bekannte Mengen cTnI-Antikörper enthalten, wurden mit 10.000 ng/ml Skeletttroponin I, 2.000 ng/ml Troponin T und 20.000 ng/ml Herzmyosin, 1.000ng/ml Troponin C und 8.000 ng/ml Herz-Tropomyosin getestet. Es wurde keine Kreuzreaktivität festgestellt. Dies zeigt, dass der Troponin I (cTnI) Test eine hohe Spezifität auf Herztroponin I hat.
Leistungstest
Drei verschiedene Krankenhäuser erhielten beimpfte Vollblut-Proben. Eine Blutproben-Gruppe war mit 2.5 ng/ml partiell aufgereinigtem humanem cTnI (bestimmt nach Dade s Stratus Cardiac Troponin-I Fluorometric Enzyme Immunoassay) versetzt worden, eine zweite Gruppe erhielt 10 ng/m cTnI. Eine dritte, nicht mit cTnI versetzte Gruppe diente als Kontrolle. Die einzelnen Standorte (Krankenhäuser) erhielten jede Probe in fünffacher Ausführung und somit eine Gesamtzahl von fünfzehn Proben pro Standort. Wie in der nachfolgend aufgeführten Datentabelle dargestellt, wurden sowohl beim Vergleich der Leistung der verschiedenen Standorte als auch innerhalb der Testserie bei den drei verwendeten cTnI-Konzentrationen eine Übereinstimmung von 100% festgestellt. | Standorte | Negativkontrolle | Versetzt mit 2.5ng/ml | Versetzt mit 10ng/ml | % Übereinstimmung der Leitung innerhalb der Testserie | | Standort 1 | 0/5 | 5/5 | 5/5 | 100 | | Standort 2 | 0/5 | 5/5 | 5/5 | 100 | | Standort 3 | 0/5 | 5/5 | 5/5 | 100 | | % Übereinstimmung bei Standortverleich | 100 | 100 | 100 | |
Korrelation der Assay-Ergebnisse von Vollblut und Plasma
Dreißig (30) klinische Vollblut-Proben wurden im Troponin I-Test getestet. Das Plasma dieser Proben wurde isoliert und zur gleichen Zeit getestet. Die Übereinstimmung zwischen den beiden Verfahren betrug 100% (30/30).
| | | Ergebnis cTnl Plasma | Gesamt | | Ergebnis cTnl Plasma | | Positiv | Negativ | | | Positiv | 12 | 0 | 12 | | Negativ | 0 | 18 | 18 | | Gesamt | 12 | 18 | 30 |
Assay-Ungenauigkeit am oder nahe des Cutoff
Die Daten, die zur Erstellung der nachfolgend dargestellten Ergebnisse der klinischen Korrelationsstudie eingesetzt wurden, wurden zur Untersuchung der Assay-Genauigkeit nahe des Cutoff-Werts von 1,0 ng/ml (bestimmt nach Dades Stratus CardiacTroponin-I Fluorometric Enzyme Immunoassay) verwendet. Achtzig (80) klinische Proben mit einem cTnI-Wert von 0.5 bis 2.5 ng/ml wurden mit dem quantitativen Assay in Intervallen von 0.5 ng/ml cTnI gruppiert. Die Ergebnisse des Troponin I-Tests wurden erfasst wie nachfolgend dargestellt. Gruppe klinische Proben
(ng/ml cTnl level) | Anzahl der Proben | cTnl Ergebnisse | | Anzahl von positiven Ergebnissen | Anzahl von negativen Ergebnissen | | 0.50 - 0.99 | 21 | 3 | 18 | | 1.00 - 1.49 | 15 | 11 | 4 | | 1.50 - 1.99 | 28 | 20 | 8 | | 2.00 - 2.49 | 24 | 21 | 3 |
BIBLIOGRAPHIE
Adams, et al. Biochemical markers of myocardial injury, Immunoassay Circulation 88: 750-763 (1993). Mehegan JP, Tobacman LS, Cooperative interaction between troponin molecules
bound to the cardiac thin filament. J. Biol. Chem. 266:966 (1991)´ Adams, et al. Diagnosis of Perioperative myocardial infarction with measurements of cardiac troponin I. N.Eng.J. Med 330:670 (1994). Hossein-Nia M, et al. Cardiac troponin / release in heart transplantation. Ann.Thorac. Surg. 61 : 227 (1996). Joint European Society of Cardiology/American College of Cardiology: J.Am. Coll. Cardio., 36(3), „Myocardnial Infarction Redefined," 2000. Antman EM, Tanasijevic MJ, Thompson B, et al. Cardiac-specific troponin I levels to predict the risk of mortality in patients with acute coronary syndromes. N Engl J Med. 335:1342-1349 (1996)
(akt. 18.04.2011)
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